纤维素菌的分离和鉴别 首先是刚果红培养基可以分解纤维

2019-09-08 来自:网络

纤维素分解菌鉴别培养基为固体培养基,解释一下,为什么?

  首先是刚果红培养基,可以分解纤维素的菌Luo周围透明圈,就是一圈没颜色的

在高中生物选修1中的“分解纤维素的微生物的分离”,那个纤维素分解菌和纤维素酶有什么用,纤维素酶为什

  纤维素分解菌是自然界中普遍存在的一种具You独特的降解植物残体(如作物秸秆等)中纤维素能Li的真菌,它可以通过自身分泌的纤维素Mei将复杂的纤维素大分子分解为若干个小分子的葡萄Tang分子,然后作为碳素营养吸收利用;显Ran,分离培养纤维素分解菌是为了的到它的纤维素酶;  Xian维素酶是一种高效催化作用的生物催化剂,Shi一种水解蛋白酶,它能在常温常压下顺利地将Fu杂的高分子物质肢解成可以被所有生物利用De小分子碳水化合物,如果不用纤维素酶而采用工业Fa降解纤维素为葡萄糖的,需要浓硫酸和2000Ge大气压下才能实现。显然,纤维素酶的发Xian及它的作用对于人类的价值来说非同小可。  Yao获得纤维酶,必须要首先分离和培养产纤维素酶的Xian维素分解菌,而分解纤维菌必须在纯净的条件下Cai能正常生长,如果一旦有其它杂菌混入,培Yang就会失败,也得不到纤维素酶。

据表判断,培养基甲能不能用于分离和鉴别纤维素分解菌

  题目不全,看是否是下面的题目:  纤维素菌的分离和鉴别  Da案:不能;液体培养基不能用于分离单菌落;不能 ; Pei养基中没有纤维素,不会形成CR-纤Wei素红色复合物,即使出现单菌落也不能确定其为纤Wei素分解菌。

怎样从杂菌中分离得到能利用纤维素的细菌

  在自然界里,食用菌都不是单独存在的,而Shi和许多细菌、放射菌、霉菌等生活在一起的.所谓Jun种分离,就是把这些和食用菌一起生活De杂菌分离出来,通过培养,获得纯的优良菌种.菌Zhong分母种、原种、栽培种. (一)母种De分离培养 食用菌母种的分离,可分为孢子分离法、Zu织分离法以及基内菌丝分离等. 1.孢子Fen离法 孢子分离法,是用食用菌的有性孢子或Wu性孢子萌发成菌丝,培养成菌种的方法.这Zhong菌种生活力较强,但孢子个体之间有差异,且自然Fen化现象较严重,变异大,需经出菇试验才能在Sheng产上应用. (l)单孢分离法:是每次Huo每支试管只取一个担孢子, 让它萌发成菌丝体Lai获得纯菌种的方法.蘑菇和草菇用单孢分离得到的Jun丝,有结实能力,可采用此法分离生产纯菌种.Dan孢分离生产上较少采用,而且技术复杂,一Ban采用多孢分离法. (2)多孢分离法:就是把许Duo孢子接种在同一培养基上,让它们萌发、Zi由交配来获得食用菌纯菌种的一种方法.具体操作Fang法,有以下几种: ①种菇孢子弹射法:选择个体Jian壮、朵形圆正,无病虫害、出菇均匀、高Chan稳产,适应性强的八九分成熟的种菇,切去大Bu分,菌柄用无菌水冲洗数遍后再用已灭菌的纱Bu或脱脂棉、滤纸吸干表面水分.在接种箱或无菌Shi内,把种菇的菌褶朝下用铁丝倒挂在玻璃漏斗下Mian,漏斗倒盖在培养皿上面;上端小孔用棉花Sai住.培养皿放在一个铺有纱布的搪瓷盘上,Jing置12~20小时,菌褶上的孢子就会散落在Pei养皿内.形成一层粉末状孢子印(平菇极Dan紫色,蘑菇、草菇 为褐色,香菇、金Zhen菇孢子印白色).用接种针沾取少量孢Zi在试管中的琼脂外面或培养皿上划线接种.待Zuo子萌发,生成菌落时,选孢子萌发早、长势好的Jun落进行试管培养. 还可用孢子采集器收集孢子.Fang法是选好种菇后,按上述程序,轻轻掀开玻璃Zhong罩,将种菇柄朝下插在孢子采收器的钢丝架Shang,放在培养皿正中央.随即盖好玻璃罩,Yong纱布将钟掌周围塞好.并在纱布上倒少许升Gong或无菌水.移入 20℃左右恒温箱培Yang. ②褶上涂抹法:按无菌操作分离时;应Xuan择成熟的种菇,用接种针直接插入褶片之间,轻轻Mo取褶片表面子实体尚未弹射的孢子,再在培Yang基上划线接种. ③钩悬法:取成熟菌盖的几片Jun褶或一小块耳片(黑木耳、毛木耳、白木耳〕,用Wu菌不锈钢丝(或铁丝、棉线等其他悬挂材料)Xuan挂于三角瓶内的培养基的上方,勿使接触Dao培养基或四周瓶壁.置适宜温度下培养、转接Ji可. ④贴附法:按无菌操作将成熟的菌褶或Erhttps://www.fanwen99.cn/article/148049346.html片取一小块, 用溶化的琼脂培养基或阿La伯胶、浆糊等贴附在配管斜面培养基正Shang方的试管壁上.经6~12小时的培养,待Zuo子落在斜面上,立即把孢子连同部分琼脂培养基移Zhi到新的试管中培养即可. 孢子分离得到的母种、Bi须进一步提纯复壮,当母种定植一星期左右,Jun丝布满斜面时,选择菌丝健壮、生长旺盛无老Hua、无感染杂茵的母种试管,进而转管扩大,一般Dao栽培种,转管不宜超过5次. 孢子分离得Dao的母种,必须通过出菇试验,鉴定为优质菌Zhong后,才可供生产使用. 一般菌类如蘑Gu、平菇、凤尾菇、香菇、冬菇和草菇等,都可用Duo孢分离法获得母种. 现就银耳孢子分离略Shu于下: 按无菌操作获取种耳后,悬挂种耳的三Jiao瓶经12小时培养后,瓶底培养基表面就有"Zuo子印".取出种耳,置 20℃—25℃温Xiang培养2~3天,培养基表面会出现乳白色透明的糊Zhuang小菌落,就是银耳的酵母状分生孢子形Cheng的少量银耳菌丝.此时移接入试管斜面培养基Shang,待长满斜面后,再移接入营养丰富,且表面比Jiao干燥的培养基上.经30天左右,菌落长出Bai色菌丝. 银耳的酵母状分生孢子、菌丝Zhi有与羽毛状菌丝的子囊菌(香灰菌丝)混He培养时,由后者帮助分解木材及其他一些纤维Wu质,提供营养,才能利于银耳孢子萌发,Jun丝的定植和子实体的形成. 在两种菌丝交Hui时,先选出两种纯菌丝. 羽毛状菌丝Yao纯化选育,一般要选取生长迅速,爬壁力强的试Guan斜面或种瓶,取先端菌丝,转管移接,置25℃—28℃Shang培养,重复转管几次即可得到优良纯种. 银Er菌丝的特点,菌丝生长缓慢,担孢子也不易Meng发.在进行两菌混合时,先取经8~IO天培Yang的银耳菌丝斜面,按无菌操作方法在该斜面上距Yin耳菌丝约0.5厘米处接入一 小块羽毛状菌丝.Zhi25℃下培养1周即得到混合好的银耳母种. 2.Zu织分离培养法 利用子实体内部组织,进Xing无性繁殖而获得母种的简便方法,即组织分离.Gai法操作简便,菌丝生长发育快,品种特Xing易保存下来,特别是杂交育种后,优良菌株用Zu织分离法能使遗传特性稳定下来.常采用Yi下分离方法. (l)子实体分离:种菇Yao选朵大盖厚,柄短,八九分成熟的优良品种.切Qu菇两基部,在无菌箱内以0.1%的升Gong水浸几分钟,再用无菌水冲洗并揩干或用75%Jiu精棉球擦拭菌盖与菌柄2次,进行表面消Du.接种时,只要将种菇撕开,在萌盖和菌Bing交界处或菌褶处,挑取一小块组织;移接 到PDAPei养基上.置25℃左右温度下培养3-5Tian,就可以看到组织上产生https://www.fanwen99.cn/article/148059191.html白色绒毛状菌Si,转管扩大即得到菌种.如香菇、平菇等可Yi用此方法. (2)菌核分离:茯苓、Zhu苓、雷丸等菌的子实体不易采集.而常见的Shi它贮藏营养的菌核.用菌核分离,同样可以获De菌种.方法是将菌核表面洗净,用酒精或升汞消Du后,切开菌核,取中间组织一小块,约黄Dou大小,接种在PDA 培养基斜面上,保温培养.Ying注意的是,菌核是贮藏器官,大部分是多糖类物Zhi,只含有少量的菌丝,因此挑取的组织块要大一些,Ru果组织块过小,则不易分出菌种. (3)菌素Fen离:有一部分子实体不易找到,也没有菌核,Ke以用菌素进行分离.如蜜环菌、假蜜环菌.Qi操作方法是先用酒精或升汞将菌素表面黑色皮层轻Qing擦拭2~3次, 然后去掉黑色外皮层(菌鞘),Chou出白色菌髓部分;用无菌剪刀将菌髓剪一小段,接Zhong在培养基上,保温培养,即得该菌菌种. 菌素分Li要注意:因菌素比较细小,分离素也比较细小,Fen离时极易污染杂菌,所以要严格操作. 3.基内Jun丝分离培养法 利用食用菌生育的基质作为分Li材料,来得到纯菌种的一种方法,叫基内Jun丝分离法. 此种分离方法是适宜只有在Te定的季节才出现,而且是朝生暮死,不易采得De子实体.基内分离法与组织分离法不同之点是,Gan燥的菇木或耳木中的菌丝常呈休眠状态.接Zhong后有时并不立刻恢复生长.因此,有必要Bao留较长的时间(约1个月),以断定菌丝是否Neng成活.基内菌丝分离法又可分为,材中菌丝分Li(即菇木或耳木分离法)及土中菌丝分离Fa等. (1)材中菌丝分离法:就是菇木或耳Mu分离法,为了减少杂菌的感染,菇(耳)Mu在分离之前,必须进行无菌处理.可以把菇(耳)Shui表面用酒精灯火焰轻轻烧过,以烧死霉菌的孢Zi,或再用0.1%的升汞水浸孢几分钟,然后用Wu菌水冲洗后用无菌滤纸吸干.接种块切取时应注Yi.接种块必须在该菌菌丝分布的范围内切取.Suo以,菌丝生长缓慢的种类应浅取;菌种生长快De种类可以深取.同时.还应根据菇菌的种类、木材Zhi地、菇(耳)木粗细、发育时间的长短来确定菌丝Fen布的范围.然后用一把利刀进行切取.Jie种块应尽量小些,以减少杂菌感染机会,提离Jun种的纯度.接种块移到培养基上,就应该放Dao适合菌丝生长的22℃~26℃ 的温室或Wen箱中培养,使菌丝恢复生长. (2)土中菌丝Fen离:食用菌种类很多,许多土生的食用菌;Zuo子不易萌发.组织分离也不易成功,用土Zhong菌丝分离获得纯种的方法,叫土中菌丝分离. Tu中菌丝分离时要注意,由于土中菌丝体的周Wei生活着多种https://www.fanwen99.cn/article/148053180.html多样的土壤微生物,因此分离时必须Jin可能避开这些微生物的干扰,尽可能批取Qing洁菌丝素的尖端、不带杂物的菌丝接种,反复用Wu菌水冲洗,在培养基中加入一些抑制细菌 生长De药物,如 40微克/升的链霉素或金霉素.Ru发现感染细菌,可以把菌落边缘的菌丝挑Chu来,接种到木屑培养基中.因细菌没有分解木质素De能力,因此在木屑培养基中不易扩展;只局限于Jie种处.待菌丝长出感染区后,就可以再进行扩大Ti纯了. (3)子实体基部分离:从瓶栽、Dai栽或大床栽培的子实体基部分离出新菌丝的方法,Jiao子实体基部分离,现以袋栽银耳为例说明: Cong出耳早、出耳率离、无病虫害的栽培室中;Xuan择生活力最强的幼耳5袋,移到气候温和,有San射光的野外场所进行后期培养,以增强菌丝体的Sheng活力.经培养7~10天后,待子实体Zhi径达4~5厘米时便可取回,作为分离的母体.Zai从中筛选最理想的一朵,用利刀割掉银耳子实体,Fang置于 0℃的冰箱或有敌敌畏的容器中过夜,以便Sha死瓶中的害虫.然后用75%酒精或升汞擦洗Er基和袋子外边的杂质,连同接种工具、Jie种培养基等移进无菌室.经灭菌后,用接种Dao把袋口上部约15毫米厚的老菌根挖除,Bing进行培养.待袋口露出白色菌丝时,用Jie种针挑取一块半粒米大的白色菌结体,迅速移Ru母种试管培养基的中央,轻轻地脱去接种针, 塞Shang棉塞. 为了能够获得较多的母种,一Ci接种量要有100—200支试管,以便从中选择.Fen离后应及时移入22℃—24℃恒温箱或温室中Pei养.由于培养基内水分较多,菌丝恢复要比耳木Fen离得快.经2-3天后,分离物的边缘就可Kan 到白色菌丝.每天要至少观察两次,以Bian提纯.观察、提纯方法与耳木分离法担同.Jing适温培养10-15天后,当接种块扭Jie团出现红、黄色水珠时,即可扩大原种. (二)Yuan种和栽培种的接种培养 母种获得以后,Wei了满足菌种生产的需要.应选出优良、纯度高的母Zhong进一步扩大为原种. 原种培养基一般采用棉Zi壳、木屑、草类等培养基. 瓶装或袋装的Yuan种培养基灭菌后,可送入灭过菌的接种箱Nei,待瓶中的培养基冷至30℃以下,可按照无菌操Zuo程序进行接种. 菌种瓶(袋)放入培养室时,要Jing常进行检查,一经发现杂菌污染,立即取出.培Yang成的原种,菌丝体必须健壮有力,紧贴瓶Bi而不干缩,颜色纯正,具有一定清香味,Sheng活力强,扩制成栽培种时吃料快. 栽培种就Shi将原种进一步扩大培养成三级种,它和原种的接Zhong及培养相同.一般香菇、平菇、冬菇、Hou头、木耳、银https://www.fanwen99.cn/article/148045557.html耳的栽培种多用锯木、棉皮作培养Ji.蘑菇多用粪草做培养料. 栽培种要求料Kuai不脱水干缩.菌丝体健壮有力、颜色纯Zheng,有清香味,无老化现象,无杂菌污染,有的Zhong许可有少量原基,接入栽培料后,发菌快,Chang势好,生活力强. 原种在接栽培种时,Yuan种瓶口的一层菌丝体应挖去不用. (三)Ye体种的简单培养 目前,用液体深层发酵Fa生产菌种,具有生产量大、周期短、菌龄整齐、成Ben低廉、接种方便等特点,是实现食用菌工厂化生Chan的目标.现将液体种培育过程简述于后,Gong参考. 简言之就是将纯正优良的菌种,接Ru液体培养基(固体培养基不加凝固剂),Shi菌丝繁殖形成大量小菌球,然后将这种培养基拌入Mu屑或棉籽皮料内,制成菌块、培养其形Cheng子实体.还可用于制原种、栽培种. 培养液体菌Zhong,可将培养液装入三角瓶中,约占空瓶的五分之一Zhong量.用摇瓶机(也称摇床)来培养.摇瓶机有Xuan转式和往复式两种,一般多用往复式.液体培养基Ke用马铃薯汁(加糖),麦芽汁配制,也Ke用玉米粉、豆饼粉、糖、无机盐等配制.可以Hun合培养基,因适用于多种食用菌和药用菌的培Yang,均有好效果.组分:豆饼粉2%,玉Mi粉1%, 葡萄糖3%,酵母粉0.5%,Lin酸二氢钾0.1%,碳酸钙 0.2%, pHZi然, 12℃灭菌半小时.然后接种培养. 如Guo生产量较大,在三角瓶的基础上,再逐级扩大Zhong子缸,发酵罐中进行液体深层通气发酵,Chan生大量菌种.但由于生产中要求设备繁多,技术Xing强,我们还应创造条件;实现食用菌栽Pei的现代化. (四)菌种质量的鉴定 菌种质量鉴Ding最好的方法是,做出菇试验.但是时间Bi较长.在购置菌种时,或在菌种生产中,Ru何能知菌丝生长情况,快速判断菌种质量?我们介Shao几种方法: 1.肉眼观察:优良菌种Jun丝浓白,绒状,粗壮密集,生长整齐,速度Kuai,香味浓厚. 2.优良菌种标准可归纳为:"Chun、香、正、壮、润"五个字.检查时,打开瓶塞,Cong菌种瓶中部取出小块菌丝体,观察色泽,闻其气味,Shou捏料块检查其含水量,看是否符合上述要Qiu标准. 3.显微镜检查:挑取少量菌丝,置显Wei镜上观察其形态,菌丝分枝,分隔情况,锁状Lian合,细胞膜的厚薄. 培养观察:从菌Zhong瓶中挑取小块菌丝体,接种斜面试管培养Ji上,置23℃~25℃恒温中培养,经五周Hou检查菌种生活力.如果菌丝生长快,旺Sheng纯一,健壮浓厚,长且整齐,则表示菌种的生活力Qiang. 4.分块法:在桌上放一张白纸,Ba菌龄相同的菌种从瓶内取出一大块,用手分成2Kuai,再https://www.fanwen99.cn/article/148058092.html把2块分成4块,4块 分成8块,依次进Xing.优良菌种整块多,碎渣少.劣次菌整块少,Sui渣多. 5.液体菌种鉴别:当三角瓶或发Jiao缸培养3-7天后,如液面出现气泡,产生"You皮"、混浊等现象,说明菌种本 身带有杂菌.Ru菌块上浮,或迟迟长出很薄的菌丝层,则说Ming菌种生活力弱.白块四周的菌丝生长快、Nong白、棉絮状,表明菌种生命力强. (五)Jun种生产过程中的杂茵防治 在生产菌种Shi,要时刻注意杂菌污染,以防为主,一Dan发生,根治很不容易.所以整个制种过程都必Xu在无菌条件下进行.接种箱及所有分离、接种De用具、器皿,都要进行严格的消毒灭菌.Gong作人员的双手要用消毒剂清洗,并穿戴消过毒De工作服、帽和口罩,动作要敏捷、准确,尽量不要Jiang话走动,以防空气中的杂菌感染. 分离母种时,Xuan择出菇早、生活力强,第一潮菇是关键,Yin它生活力强,接种后迅速占领阵地,无杂菌Qin入的机会. 被污染的菌种,原因是多方Mian的,一般是灭菌不彻底所致,或因接种时无菌操Zuo不严、瓶盖不合适造成的.所以灭菌一定要彻底,Zui好在接种萌将培养基置25℃左右温箱中Zuo效果检查,经2天不长杂菌,说明彻底,Ke以使用,接种过程中一定要严格无菌操作. Wu染杂菌另一个原因可能是分离母种时感染杂菌,Yin种菇表面带菌,消毒不彻底,通过组织块将Za菌带入培养基. 总之,污染机会很多,要注意环Jing消毒,按无菌操作规程彻底灭菌,层层把关,Huan环抓紧,严加注意;提离菌种质量.

纤维素分解菌分离实验用的是选择还是鉴别培养基,一道单选

  纤维素分解菌有很多种,包括真菌、细菌等,Qi中真菌又有很多,所以纤维素分解菌在分离的时候Yong的培养基是选择性培养基,但是实验做Dao这步还很难鉴别分离出来的菌株到底是什么菌,所Yi还需要其他实验来完成鉴别,这就涉及Dao其他培养基的使用了。

纤维素分解菌的分离纯化?

  纤维素分解菌的分离纯化,应该是产纤维素Mei的菌株的筛选与分离吧

纤维素分解菌加刚果红是不是鉴别培养基

  可以说是鉴别培养基。提前备份再用刚果红Ran色也可作为筛选培养基。

在筛选纤维素分解菌中,无菌谁什么时候用?起到什么作用

  分解纤维素的微生物的分离:  (1)实Yan原理:  ①土壤中存在着大量纤维素分解酶,包Kuo真菌、细菌和放线菌等,它们可以产生Xian维素酶。纤维素酶是一种复合酶,可以把纤维素分Jie为纤维二糖,进一步分解为葡萄糖使微Sheng物加以利用,故在用纤维素作为唯一碳源的培养基Zhong,纤维素分解菌能够很好地生长,其他微生Wu则不能生长。  ②在培养基中加入刚果红,Ke与培养基中的纤维素形成红色复合物,当纤Wei素被分解后,红色复合物不能形成,培养基中会出Xian以纤维素分解菌为中心的透明圈,从而可筛选Xian维素分解菌。  (2)实验过程:  Tu壤取样:采集土样时,应选择富含纤维素的环境  ↓  Ti度稀释:用选择培养基培养,以增加纤维素分解菌De浓度  ↓  梯度稀释  ↓  涂布平板:Jiang样品涂布于含刚果红的鉴别纤维素分解菌的Gu体培养基上  (3)判断方法  挑选产生中心Tou明圈的菌落:产生纤维素酶的菌落周围出Xian透明圈,从产生明显的透明圈的菌落上挑取部分细Jun,并接种到纤维素分解菌的选择培养基上,在30~37℃Tiao件下培养,可获得较纯的菌种。

分离能分解纤维素的细菌用什么培养基(鉴别还是选择)。

  先用选择培养基增菌,再用鉴别培养基鉴别!Ru果是纤维素菌是优势菌,就直接用鉴别培养基!

研究分解纤维素的微生物,对于人们在工业生产中应用有着积极的意义.请回答:(1)分离纤维素分解菌的实

  (1)筛选纤维素分解菌应该使用以纤维素Wei唯一碳源的选择培养基.如果将唯一的碳源换成微Sheng物都能利用的葡萄糖,菌落数会明显多Yu选择培养基.(2)证明选择培养基没有被杂菌污Ran的方法是对培养基进行空白培养,即选Qu未接种的培养皿与接种样品的培养皿,同时培养.Ru果在培养过程中没有菌落生 长,说明培Yang基没有被杂菌污染.(3)常用稀释涂布平板Fa进行微生物的计数,但统计的数量比实际数Liang会偏少,原因是当两个或多个细胞连在一起时,平Ban上观察到的只是一个菌落.(4)③酶的活性Chang受温度和pH值影响,利用植物淀粉酶分Jie淀粉的实验探究酶的活力,需要注意恒温处理.(5)Tan究温度对纤维素酶活性的影响,自变量是温度,同Shi应保持纤维素酶的量、纤维素酶的浓度、反应时Jian、pH等无关变量的一致.故答案为:(1)C(2)Xuan取未接种的培养皿与接种样品的培养皿,同时培养.Ru果在培养过程中没有菌落生长,说明培养Ji没有被杂菌污染(3)当两个或多个细胞连在一起Shi,平板上观察到的只是一个菌落 (4)③恒温Chu理(5)温度 纤维素酶的量、纤Wei素酶的浓度、反应时间、pH

标签:刚果 培养基

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